|
Szanowni Państwo, Kontynuując serię spotkań edukacyjnych poświęconych technologii real-time PCR dostosowujemy się do oczekiwań jakie przekazali nam w ankietach i bezpośrednich rozmowach uczestnicy poprzednich spotkań z tej tematyki. Tym razem proponujemy formułę seminarium i warsztatów podczas których każdy uczestnik będzie mógł krok po kroku zaplanować zakup sprzętu i wdrożenie technologii, przystosowanie ich do własnych potrzeb, zaprojektowanie reakcji i niezbędnych odczynników. Zaplanowaliśmy dla Państwa zajęcia w małych grupach, z wykorzystaniem komputerów oraz bezpłatnego i komercyjnego oprogramowania. Istotną częścią spotkania będzie możliwość skonsultowania własnych wyników z grupą specjalistów, od lat działających w różnych obszarach aplikacyjnych.
Marta Domańska Koordynator Projektu Centrum Edukacji Medycznej CEMED
ZAPRASZAMY: biologów molekularnych i biotechnologów, diagnostów laboratoryjnych, pracowników stacji epidemiologicznych i stacji krwiodawstwa, pracowników zakładów kryminalistyki, studentów i pracowników naukowych.
Prowadzący:
- dr Izabela Sitkiewicz, Narodowy Instytut Leków
- dr Marcin Hołysz, Uniwersytet Medyczny w Poznaniu
- dr Tomasz Dzieciątkowski, Warszawski Uniwersytet Medyczny
PROGRAM
|
9.50
|
Rozpoczęcie spotkania i powitanie uczestników
|
5 min
|
|
9.55
|
Wykład wprowadzający:
Podstawy i kierunki rozwoju technik real-time PCR
- RT-PCR to zbór technik, które można użyć do różnych zastosowań a nie jedna technika
- Podstawowe różnice między klasycznym PCR, Real-Time PCR a ilościowym PCR (qPCR)
- Zasada działania techniki
- Rodzaje sond i metody detekcji
- Terminologia używana w opisie reakcji
- Podstawy pomiaru ilości produktu
- Podstawowe zastosowania
- Perspektywy
dr Izabela Sitkiewicz, Narodowy Instytut Leków
|
45 min
|
|
10.40
|
Praktyczne rady dotyczące zakupu i eksploatacji urządzeń Real-time PCR
- funkcje podstawowe
- funkcje zaawansowane
- certyfikaty
- koszty eksploatacji
- odczynniki i gotowe zestawy
- kontrola jakości
dr Marcin Hołysz, Katedra i Zakład Biochemii i Biologii Molekularnej, Uniwersytet Medyczny w Poznaniu dr Tomasz Dzieciątkowski, Centralny Szpital Kliniczny, Warszawski Uniwersytet Medyczny
|
30 min
|
|
Blok tematyczny: Planowanie eksperymentu
|
|
11.10
|
Przerwa obiadowa
|
50 min
|
|
Blok warsztatowy
|
|
12.00
|
Grupa I Zajęcia przy komputerach. Każdy uczestnik ma zapewnione osobne stanowisko pracy. Projektowanie sond i primerów
dr Marcin Hołysz, Katedra i Zakład Biochemii i Biologii Molekularnej, Uniwersytet Medyczny w Poznaniu
Grupa II Planowanie, czyli najpierw zastanów się, co chcesz zrobić
- DNA czy RNA?
- Eukarionty czy prokarionty?
- Detekcja czy wyznaczanie ilości?
- Pomiar bezpośredni czy metody referencyjne?
- Wyznaczenie genu referencyjnego
- Singleplex czy multiplex?
- ...
Opracowanie protokołu w zależności od zadania
- Wybór chemii reakcji
- Wybór/projektowanie sond i starterów
- Wybór odpowiedniej mieszaniny reakcyjnej
- problemy z interpretacją wyników otrzymanych metodami "home-made"
- Pipetowanie, czyli o kontrolach i powtórzeniach
- standaryzacja i certyfikacja metod wewnątrzlaboratoryjnych
- Program amplifikacji
- ...
Testowanie warunków reakcji
- Krzywe wzorcowe
- Magiczny wzór y=-3.33x + a
Zajęcia interaktywne: Eksperyment i jego interpretacja
Przykładowe 2 lub 3 eksperymenty pokazane od krzywej do wyniku przedstawiają prowadzący
Jak dopasować technikę real-time PCR do własnych potrzeb - omówienie projektów uczestników
dr Izabela Sitkiewicz, Narodowy Instytut Leków w Warszawie dr Tomasz Dzieciątkowski, Centralny Szpital Kliniczny, Warszawski Uniwersytet Medyczny
|
120 min
|
|
14.00
|
Przerwa kawowa
|
20 min
|
|
14.20
|
Grupa I Planowanie, czyli najpierw zastanów się, co chcesz zrobić
- DNA czy RNA?
- Eukarionty czy prokarionty?
- Detekcja czy wyznaczanie ilości?
- Pomiar bezpośredni czy metody referencyjne?
- Wyznaczenie genu referencyjnego
- Singleplex czy multiplex?
- ...
Opracowanie protokołu w zależności od zadania
- Wybór chemii reakcji
- Wybór/projektowanie sond i starterów
- Wybór odpowiedniej mieszaniny reakcyjnej
- problemy z interpretacją wyników otrzymanych metodami "home-made"
- Pipetowanie, czyli o kontrolach i powtórzeniach
- standaryzacja i certyfikacja metod wewnątrzlaboratoryjnych
- Program amplifikacji
- ...
Testowanie warunków reakcji
- Krzywe wzorcowe
- Magiczny wzór y=-3.33x + a
Zajęcia interaktywne: Eksperyment i jego interpretacja
Przykładowe 2 lub 3 eksperymenty pokazane od krzywej do wyniku przedstawiają prowadzący
Jak dopasować technikę real-time PCR do własnych potrzeb - omówienie projektów uczestników
dr Izabela Sitkiewicz, Narodowy Instytut Leków w Warszawie dr Tomasz Dzieciątkowski, Centralny Szpital Kliniczny, Warszawski Uniwersytet Medyczny
Grupa II Zajęcia przy komputerach. Każdy uczestnik ma zapewnione osobne stanowisko pracy. Projektowanie sond i primerów
dr Marcin Hołysz, Katedra i Zakład Biochemii i Biologii Molekularnej, Uniwersytet Medyczny w Poznaniu
|
120 min
|
|
16.20
|
Zakończenie spotkania
|
|
|