ZAPRASZAMY:
biologów molekularnych, biotechnologów i diagnostów laboratoryjnych (z zakresu genetyki medycznej i poradnictwa genetycznego)

Planowana ilość osób: 12-16

Reakcja łańcuchowa polimerazy DNA z analizą ilości produktu w czasie rzeczywistym (ang. real-time PCR) to jedna z najnowocześniejszych metod analitycznych mających zastosowanie w genetyce, biologii molekularnej, mikrobiologii, wirusologii, onkologii, diagnostyce medycznej i innych pokrewnych dziedzinach. Wykorzystanie sond fluorescencyjnych pozwala nie tylko na monitorowanie przyrostu ilości produktu amplifikacji w każdym cyklu prowadzonej reakcji PCR, a także jego ocenę jakościową. Realt-time PCR umożliwia oznaczanie ilości kwasów nukleinowych w materiale badanym oraz wykrywania nawet niewielkich zmian w obrębie amplifikowanych sekwencji, dzięki czemu technika ta jest niezwykle cennym narzędziem znajdującym zastosowanie zarówno w badaniach naukowych jak i w diagnostyce molekularnej. Mamy nadzieję, że warsztaty nie tylko przybliżą Państwu tą technikę, ale również ułatwią podjęcie decyzji odnośnie ewentualnego wyboru i kupna platformy, która spełni Państwa oczekiwania i będzie odpowiednia dla Państwa zamierzeń naukowych.

Prowadzący:

• dr Marcin Hołysz  notka, Katedra i Zakład Biochemii i Biologii Molekularnej, Uniwersytet Medyczny w Poznaniu
• dr Błażej Rubiś  notka, Katedra i Zakład Chemii Klinicznej i Diagnostyki Molekularnej

Umiejętności jakie muszą posiadać uczestnicy warsztatów przed przystąpieniem do zajęć:

• elementarne zasady pracy w laboratorium (praca jałowa, obsługa pipet automatycznych)
• przydatna będzie znajomość podstaw PCR
• z warsztatów skorzystają również osoby, które zetknęły się już z technologią real-time PCR (wartością będzie możliwość konsultacji trudniejszych przypadków z doświadczonymi użytkownikami różnych platform sprzętowych)

Umiejętności jakie nabędą uczestnicy warsztatów:

• dobór i zakup sprzętu do prowadzenia reakcji Real-time PCR
• projektowanie eksperymentów – projektowanie starterów i sond do oznaczeń ilościowych i jakościowych techniką real-time PCR
• przeprowadzanie oznaczeń ilościowych (kwantyfikacja względna i bezwzględna)
• przeprowadzanie oznaczeń jakościowych (genotypowanie SNP)
• rozwiązywanie problemów technicznych związanych z analizą wyników i obsługą sprzętu
• w trakcie warsztatów będzie też możliwość konsultacji własnych wyników uczestników kursu z doświadczonymi użytkownikami różnych platform sprzętowych, praktykami w dziedzinie technik biologii molekularnej)

Zajęcia praktyczne oparte będą o następujące reakcje, znajdujące zastosowanie w molekularnej diagnostyce medycznej:

• ilościowe oznaczanie poziomu ekspresji genu badanego i referencyjnego z użyciem sond hydrolizujących w układzie multiplex Dual-Color
• genotypowanie pojedynczo-nukleotydowych polimorfizmów (SNP) za pomocą krzywych topnienia wysokiej rozdzielczości (High Resolution Melting, HRM)
• genotypowanie polimorfizmów SNP za pomocą sond hybrydyzujących (Melting Curve Genotyping) lub allelo-specyficznych sond hydrolizujących (Endpoint Genotyping)

PROGRAM